Определение мочевой кислоты

Мочевая кислота является конечным продуктом распада пуриновых оснований. Нормальное содержание от 2,35 до 5,9 ммоль/сут. Содержание мочевой кислоты увеличивается при состояниях, сопровождающихся повышенным образованием пуринов, распадом тканей (лейкозы, распадающиеся опухоли, разрешающаяся пневмония), а также при приеме пищи, богатой пуринами.

Принцип метода основан на способности мочевой кислоты восстанавливать фосфорно-вольфрамовую кислоту с образованием окрашенного в синий цвет соединения. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации мочевой кислоты.

Реактивы: 1) 10% раствор вольфрамата натрия: 11,2 г Na2WO4 × 2Н2O растворяют в 88,8 г дистиллированной воды; 2) 0,35 М раствор серной кислоты: к 200 мл дистиллированной воды добавляют 10 мл H2SO4 с относительной плотностью 1,84 и доводят объем до 500 мл; 3) насыщенный раствор карбоната натрия (Na2CO3); 4) 50% раствор мочевины [CO(NH2)2]: 50 г мочевины растворяют в 50 мл дистиллированной воды; 5) фосфорно-вольфрамовый реактив: 50 г Na2WO4, 10 г Na2HPO4, 150 мл дистиллированной воды, 12,5 мл концентрированной серной кислоты (d = 1,84), растворенной в 50 мл Н2O; кипятят в колбе с обратным холодильником в течение часа, затем дистиллированной водой доводят объем до 500 мл.

Ход определения. В пробирку вносят 0,1мл только что выпущенной мочи и 0,99 мл дистиллированной воды, тщательно перемешивают. В центрифужную пробирку вносят 0,5 мл разведенной мочи, 2,5 мл дистиллированной воды, 1 мл 10% раствора Na2WO4, 1 мл 0,35 М раствора серной кислоты. Содержимое проб тщательно перемешивают и через 10 мин центрифугируют. К 2,5 мл супернатанта прибавляют 0,75 мл насыщенного раствора Na2CO3, 0,75 мл 50% раствора мочевины и 1 мл фосфорно-вольфрамового реактива. Через 20 мин фотометрируют при длине волны 610 им (красный светофильтр) в кювете с длиной оптического пути 1 см против контрольной пробы, которую обрабатывают так же, как и опытную, но вместо супернатанта берут 2,5 мл воды.

Расчет производят по калибровочной кривой или по стандартному раствору мочевой кислоты, который обрабатывается как опытная проба.

Клиническое значение. Кристаллы мочевой кислоты обнаруживаются в моче при большой потере жидкости организмом: повышенное потоотделение, понос, рвота.

Лекарственные препараты, используемые для лечения лимфом, лейкозов, часто вызывают повышение уровня мочевой кислоты.

Высокая концентрация мочевой кислоты и низкое значение pH могут привести к образованию камней мочевой кислоты в мочевом тракте.

Пониженное содержание мочевой кислоты в моче обнаруживают при хроническом гломерулонефрите. Уменьшение выделения мочевой кислоты вызывает прием салицилатов, тиазидных диуретиков, хроническое потребление алкоголя.