Определения цистина в моче

Цистин — некодируемая аминокислота, представляющая собой продукт окислительной димеризации цистеина, в ходе которой две тиольные группы цистеина образуют дисульфидную связь цистина. Цистин содержит две аминогруппы и две карбоксильных группы и относится к двухосновным диаминокислотам. В организме находятся в основном в составе белков.

Цистинурия — усиленное выделение цистина с мочой, обусловленное нарушением его обратного всасывания. Цистин плохо растворим и поэтому, выделяясь с мочой в количествах до 0,3-0,4 г/л, служит причиной образования камней («цистиновые камни») — единственный клинический признак цистинурии.

Обнаружение цистина и гомоцистина

Принцип метода. Азид натрия при реакции с йодом образует комплекс бурого цвета, который обесцвечивается в присутствии цистина и гомоцистина.

Реактивы. 1) раствор йода: 12,69 г кристаллического йода растворяют в насыщенном растворе йодида калия (37 г Kl в 26 мл дистиллированной воды), переносят в мерную колбу и доводят дистиллированной водой до 1 л. Можно использовать фиксанал 0,1 н. йода; 2) раствор азида натрия: 1,5 г NaN3 растворяют в 50 мл раствора йода и доводят объем до 100 мл 96% этиловым спиртом. Раствор хранят в посуде из темного стекла в холодильнике.

Ход определения. Каплю мочи наносят на фильтровальную бумагу и после высушивания добавляют 1 каплю раствора азида натрия. В течение 5 мин наблюдают за исчезновением бурой окраски.

Оценка результатов. По времени исчезновения окраски судят о наличии аминокислот. Для полуколичественной оценки результатов окраску пробы сравнивают с цветной шкалой, для получения которой готовят раствор, содержащий по 0,6 мг цистина и гомоцистина в 1 мл. Из него готовят растворы с содержанием аминокислот от 0,6 до 0,3 мг/мл.

Нормальные величины: бурая окраска исчезает через 2–3 мин после добавления азида натрия.

Примечание: ложно положительную реакцию дают ангидрид аргининянтарной кислоты, ацетон; некоторые лекарственные препараты.

Клиническое значение: тест положителен при наследственном нарушении обмена гомоцистеина, гиповитаминозах фолиевой кислоты, витаминов В12 и В6, а также при приобретенной Цистинурии или гомоцистинурии. Цистеин — практически единственный источник сульфатов мочи.