Сукцинатдегидрогеназа. Методика Нахласа (М. М. Nachlas) и др. в модификации Кваглино и Хейхо (D. Quaglino, F. Hayhoe)

Принцип. Активность СДГ оценивается по количеству нерастворимого диформазана синего цвета, образующегося при реакции восстановления солей тетразолия.

Реактивы.

  1. 60% водный раствор ацетона;
  2. 0,2 М фосфатный буфер с pH 7,4;
  3. 0,2 М раствор натрия сукцината;
  4. 0,6 М раствор натрия бикарбоната;
  5. 0,03 М раствор алюминия хлорида;
  6. 0,03 М раствор кальция хлорида;
  7. тетразолий нитро ВТ;
  8. 0,1% раствор прочного красного;
  9. инкубационная среда: 10 мл 0,2 М раствора сукцината натрия; 2 мл 0,6 М раствора бикарбоната натрия; 0,2 мл 0,03 М раствора хлорида алюминия; 0,2 мл 0,03 М раствора хлорида кальция; 10 мг тетразолия, растворенного в 10 мл дистиллированной воды; дистиллированной воды до 40 мл.

Ход исследования. Свежеприготовленные и высушенные на воздухе мазки фиксируют в 60% растворе ацетона при комнатной температуре в течение 30–60 с. Промывают дистиллированной водой. Инкубируют в инкубационной среде при 37 °С в течение 60 мин. Докрашивают 0,1 % раствором прочного красного в течение 10 мин.

См. также: