Нафтол-AS-ацетатэстераза. Методика Леффлера (Н. Loffler)

Принцип определения активности фермента такой же, как и для определения активности α-нафтилацетатэстеразы.

Реактивы:

  1. 40% раствор формальдегида (формалин);
  2. нафтол-AS-ацетат или нафтол-AS-D-ацетат;
  3. ацетон;
  4. 0,1 М фосфатный буфер с pH 6,8–7,0;
  5. прочный синий ВВ;
  6. краситель для ядер;
  7. инкубационная среда: 4 мг нафтол-AS-ацетата, растворенного в 0,4 мл ацетона; 40 мл фосфатного буфера, встряхивают и добавляют 80 мг прочного синего ВВ, встряхивают, фильтруют.

Ход определения. Высушенные на воздухе мазки фиксируют в парах формалина 3 мин. Инкубируют в инкубационной среде при комнатной температуре в течение 60 мин. Промывают проточной водой. Докрашивают красителем для ядер.

Нормальные величины. Фермент содержится в основном в моноцитах. По сравнению с активностью α-нафтилацетатэстеразы активность нафтол-AS-ацетатэстеразы в сегментоядерных нейтрофилах несколько выше, а в лимфоцитах — ниже. Фермент обнаружен в мегакариоцитах, ретикулярных и плазматических клетках, а также в незрелых гранулоцитах.

Клиническое значение. Повышенная активность фермента характерна для бластных клеток при остром монобластном (гистиомонобластном) лейкозе, при остром промиелоцитарном лейкозе; при других формах острых лейкозов фермент в бластных клетках не выявляется.

См. также: