Исследование крови
Нафтол-AS-ацетатэстераза. Методика Леффлера (Н. Loffler)
Принцип определения активности фермента такой же, как и для определения активности α-нафтилацетатэстеразы.
Реактивы:
- 40% раствор формальдегида (формалин);
- нафтол-AS-ацетат или нафтол-AS-D-ацетат;
- ацетон;
- 0,1 М фосфатный буфер с pH 6,8–7,0;
- прочный синий ВВ;
- краситель для ядер;
- инкубационная среда: 4 мг нафтол-AS-ацетата, растворенного в 0,4 мл ацетона; 40 мл фосфатного буфера, встряхивают и добавляют 80 мг прочного синего ВВ, встряхивают, фильтруют.
Ход определения. Высушенные на воздухе мазки фиксируют в парах формалина 3 мин. Инкубируют в инкубационной среде при комнатной температуре в течение 60 мин. Промывают проточной водой. Докрашивают красителем для ядер.
Нормальные величины. Фермент содержится в основном в моноцитах. По сравнению с активностью α-нафтилацетатэстеразы активность нафтол-AS-ацетатэстеразы в сегментоядерных нейтрофилах несколько выше, а в лимфоцитах — ниже. Фермент обнаружен в мегакариоцитах, ретикулярных и плазматических клетках, а также в незрелых гранулоцитах.
Клиническое значение. Повышенная активность фермента характерна для бластных клеток при остром монобластном (гистиомонобластном) лейкозе, при остром промиелоцитарном лейкозе; при других формах острых лейкозов фермент в бластных клетках не выявляется.
См. также: