Активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы

Принцип. При окислении глюкозо-6-фосфата в пентозном пути окисления глюкозы с участием глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ) образуется НАДФН, под влиянием которого тетразолий превращается в формазан и выявляется в виде им образованных гранул.

Реактивы. 1) 10% раствор формальдегида; 2) инкубационная среда: глюкозо-6-фосфат — 3 мг в 1 мл дистиллированной воды; НАДФ — 1 мг в 1 мл дистиллированной воды; магния хлорид — 5 мг в 1 мл дистиллированной воды; нитросиний тетразолий — 1 мг в 1 мл дистиллированной воды; 0,25 М трис-HCl-буфер с pH 7,6— 2,3 мл; феназинметасульфат — 0,5 мл.

Ход определения. На нефиксированные мазки крови наносят 0,1–0,2 мл инкубационной среды и помещают мазки в термостат при 37 °С на 75 мин. Фиксируют в 10% растворе формальдегида в течение 10 мин при комнатной температуре. Высушивают на воздухе и микроскопируют.

Нормальные величины. В эритроцитах здоровых людей обнаруживают 10–20 гранул формазана.

Клиническое значение. Снижение числа гранул формазана в эритроцитах или их отсутствие указывает на дефицит Г-6-ФДГ.

См. также: