Модифицированная методика Р. П. Нарциссова

Принцип определения активности тот же, что и в методике Грэхема–Кнолля. Для уменьшения инактивации фермента используют соответствующий стабилизатор и небольшое количество перекиси водорода.

Реактивы. 1) 60% водный раствор ацетона; 2)0,1 М раствор бората натрия (можно использовать фосфатный или мединаловый буферный раствор с pH 7,6); 3) 5% водный раствор трилона Б (этилендиаминтетраацетат натрия, ЭДТА); 4) насыщенный водный раствор бензидина дигидрохлорида; 5) 0,003% раствор перекиси водорода (готовят перед использованием .из 3% раствора в два этапа); 6) инкубационная среда: 5 мл 5% раствора трилона Б; 10 мл раствора бората натрия; 35 мл насыщенного раствора бензидина; 0,2 мл раствора перекиси водорода; 7) 0,5% раствор метилового зеленого на буферном растворе (pH 5,0) или 0,1% водный раствор метиленового синего.

Ход исследования. Свежеприготовленные мазки фиксируют 30 секунд в растворе ацетона. Промывают дистиллированной водой. Инкубируют в инкубационной среде в течение 1 ч при 37 °С, промывают дистиллированной водой. Докрашивают мазки метиловым зеленым или метиленовым синим в течение 10 мин. Можно исследовать и недокрашенные мазки.

См. также: